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烟草的分子鉴定是辨别烟草真伪，保证烟草质量，促进烟草产业现代化的十分重要的手段。但由于日晒，高温烘烤等各种处理极大地破坏了烟草DNA的完整性，同时植物富含的多酚多糖及其氧化物在上述处理过程中也会与DNA发生复杂的化学反应，所以从烟草中提取DNA比从新鲜植物中提取要困难很多。为解决这一问题，本公司上开发了烟草专用核酸纯化试剂盒。本制品是专门用于从各种烟草样品中提取高质量的DNA的试剂盒。

• 去污染效果好，得到的DNA可以直接作为PCR模板或酶切，不需要再进行去腐殖酸处理。
  
• 操作过程简单快速，整个操作只需要10多分钟，扩容性好。
  
• 产量高，每克烟草一般可以提取到5～50μg DNA，片段长度在20～50kb，OD260/280一般都在1.8以上。

• 65℃预热烟草DNA纯化溶液A2，待其沉淀溶化后充分颠倒混匀。取0.5mL加入到1.5mL塑料离心管中并放置于65℃待用。
  
• 称取0.1～0.3g的烟草，加入到研钵中，加入少量液氮冷成固体后，迅速研磨成粉状。
  
• 将粉末转移到装有预热的烟草DNA纯化溶液A2的离心管中。
  
• 将离心管置于65℃水浴中保温至少5分钟。
  
• 14000g室温离心3分钟，将上清转移到一新离心管中。
  
  • 上清液一般呈淡黄色或深棕色，上清液的体积一般为300～400μL。
• 在上清液中加入等体积的烟草DNA纯化溶液B2，上下颠倒30秒充分混匀，溶液将呈白色或淡黄色混浊状。
  
• 将离心管冰浴至少5分钟。
  
• 14000g室温离心3分钟，转移上清到新的1.5mL离心管中，上清液颜色将比第4步得到的上清的颜色稍淡，体积在0.7mL左右。
  
  • 下面第9～10步的氯仿抽提操作可以省略，直接进入第11步，但DNA的产量会低50%左右，OD260/280在1.7-1.8。如果省略第9～10步直接进入第11步，则转移的溶液体积不要超过0.6mL，否则没有空间加A型通用上柱液。
• 加入0.2mL的氯仿(自备)，震荡器上充分振荡30秒混匀。
  
  • 一定要让管底的溶液震荡起来。
• 14000g室温离心3分钟，小心转移上清到新离心管中。
  
  • 离心后两相交界面将有白色膜状物，其中有机相部分颜色较深，一般呈淡棕色。上清的颜色取决于烟草中腐殖酸的含量。将上清转移到新的1.5mL离心管时，不要超过0.6mL，否则没有空间加A型通用上柱液。如果有多余的可以弃之不用。
• 加入1.5倍体积的A型通用上柱液，上下颠倒30秒混匀。
  
• 分两次上柱，即先转移一半的混合液到离心吸附柱中，14000g室温离心半分钟，弃穿透液，然后再将剩下的混合液到离心吸附柱中，14000g室温离心半分钟，弃穿透液。
  
• 加0.7mL通用洗柱液到离心吸附柱中，14000g室温离心半分钟，弃穿透液。
  
• 再加0.3mL通用洗柱液到离心吸附柱中，14000g室温离心半分钟，弃穿透液。
  
  • 增加一步洗涤能使最后得到的DNA的纯度稍有提高。
• 14000g室温再离心半分钟。此步十分重要，否则残留的通用洗柱液会污染DNA。
  
• 将离心吸附柱转移到一新的1.5mL塑料离心管中，加入50μL DNA洗脱液。
  
• 室温放置离心吸附柱1～2分钟。
  
• 14000g室温离心半分钟，离心管中溶液即为提取到的DNA样品，可以立即使用或存放于冰箱待用。